北京協(xié)和醫(yī)院-奧林巴斯顯微鏡下的精子（組圖）

一、操作程序簡述

1濕法分析包括下列內(nèi)容：①濁度，②凝集；②精子計數(shù)及其活動力評估o

2．活動擺子百分率及其動力學(xué)測定①主觀方法；②客觀方法。奧林巴斯顯微鏡

3．稿子計數(shù)①血細(xì)胞計數(shù)器；②Msrkler計數(shù)池；③計算機輔助的精液分析（con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA）。

4．制備精液讀片桔液涂片、精液染色、形態(tài)學(xué)分析。

在確定精子數(shù)量和活動力過程中，無論采用何種技術(shù)，對每一個精液樣品均需用濕法或“濕操作”．此法將使檢驗人員對稿于計致、活動情況和有關(guān)動力學(xué)具有一個初步的主觀印象，并可測定濁度和強度；在測定稿子計數(shù)及其活動力過程中，溫度顯得很重要。顯然，37°是*選擇；然而，如缺乏調(diào)節(jié)溫度的顯微鏡操作臺，整個分析過程要在此條件下完成是不可能的。通常．精液分析在室溫中進(jìn)行。正如人們所知．室溫變化范圍很大，因此，必須盡量控制操作區(qū)域的溫度。

（一）方法

精液*液化后，充分混勻，加一滴未稀釋桔液于干凈玻片上，蓋上蓋玻片。也可用自動加樣器吸lo微升精濃加至載玻上以提高測定的可重復(fù)性。在放大200—400倍（高倍鏡）的情況下觀察20個視野，評價活動稻子的百分率、相對運動速度和方向以及每一高倍視野下的精于數(shù)，評價其濁度和是否有凝塊，確定“圓形細(xì)胞”（未成熟微生物細(xì)胞和白細(xì)胞）的百分率。奧林巴斯生物顯微鏡

（二）濁度

顯然，成熟館子在精掖中占多數(shù)。但有時也會發(fā)現(xiàn)其他細(xì)胞或碎片。來自男性生殖道的亡皮細(xì)胞也會存在于精液中。在高倍鏡下，偶爾發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞并非病理指征。但息尿道炎的男子其棺液中可出現(xiàn)大量上皮細(xì)胞；有時亦可見陰道源性的上皮細(xì)胞，這種情況表明俏液樣品是經(jīng)性交中斷法收集的．此類細(xì)胞應(yīng)在報告單上注明。北京奧林巴斯顯微鏡

不成熟的病原茵細(xì)胞和白細(xì)胞也常在精液中出現(xiàn)，在染色破片上難以區(qū)別，而應(yīng)用濕法操作法則更不可能。通常用巴氏（Papnicolaou，PAP）染色來觀察這種“圓形細(xì)胞“（大于或等于成熟稻子的10％）；而濕法分析有助于確定哪些樣本需用這一方法進(jìn)一步制備。應(yīng)對白細(xì)胞的確切數(shù)目和不成熟病原茵的百分串加以確定和記錄（詳見后述）。

在精液中，還可能出現(xiàn)其他顆粒性物質(zhì)如梢膚結(jié)晶、滑石粉和殺桔劑顆粒，如發(fā)現(xiàn)量很大，則應(yīng)加以記錄。粗大茵體、毛滴蟲、念珠菌更應(yīng)加以報告。

（三）凝集

徠卡顯微鏡在某些（非全部）含抗精子抗體的桔液樣本中，精于可能發(fā)生自發(fā)性凝集，應(yīng)在主觀判斷的基礎(chǔ)上加以報告并記錄凝集類型和程度，凝集程度的評價用0-Ⅳ表示（表44）。精子凝集方式注明為：頭—頭、頭—尾、尾—尾或混合型。有時出現(xiàn)格子粘附于碎片或其他顆粒性物質(zhì)的現(xiàn)象，應(yīng)與真性凝集區(qū)別開來。這種現(xiàn)象除非根嚴(yán)重，否則一般不作報告。出現(xiàn)精于凝集提示應(yīng)作特異性抗精子抗體的檢測（見有關(guān)章節(jié)）。

（四）評估精于數(shù)、活動率及其動力學(xué)

在精液分析報告中應(yīng)記錄棺子數(shù)，避免出現(xiàn)少數(shù)、幾個、很多、大量館子等主觀性估計。但是，如果每高倍視野觀察到大量精子而實際計數(shù)所反映數(shù)量有所下降，應(yīng)該懷疑結(jié)果的難確性，并重新化驗；徠卡顯微鏡此外，還應(yīng)對精子活動串（25％、50％、75％或大于80％）和動力學(xué)特征（緩櫻隨意運動和快速直線運動）作出主觀評價，并與以客觀方法測定的結(jié)果相比較。顯然這種方法的主觀性很強，在測定者之間甚至同一測定者身上易產(chǎn)生差異。然而，這些“主觀的粗略分析”常會提示客觀分析方法的潛在錯誤。